吸光-05
実際のモル分子吸光係数は導き出し方は,先程お示ししましたこの,サイト,をなぞらさせていただきます,ありがとうございます.
単位の換算
モル分子吸光係数にはSI系とは異なる単位(モル濃度,cm)が存在しますので,その換算がややこしいです.
考え方は,例えばcmとSI単位系であるmとの換算方法は,
\(\Large 100 \ [cm] = 1 \ [m] \)
\(\Large \left[ \frac{cm}{m} \right] = \frac{1}{100} \)
となりますので,例えば,50cm,は,
\(\Large 50 \ [cm] = 50 \ [m] \left[ \frac{cm}{m} \right] = 50 \ [m] \frac{1}{100} = 0.5 \ [m] \)
と考えることができます.
ですので,モル分子吸光係数は,
\(\Large
\begin{eqnarray}
1 \left[ \frac{1}{M} \frac{1}{cm} \right]
&=& 1 \left[ \frac{L}{mol} \frac{1}{cm} \right] \\
&=& 1 \left[ \frac{10^{-3} m^3}{mol} \frac{1}{10^{-2} m} \right] \\
&=& 0.1 \left[ \frac{m^2}{mol} \right] \\
\end{eqnarray} \)
\(\Large \left[ \frac{m^2}{mol} \right] = 10 \left[ \frac{1}{M} \frac{1}{cm} \right] \)
となります.
モル分子吸光係数
では,
\(\Large \sigma = 1 \) オングストローム2 (= 0.1 nm2) として計算してみましょう.
1分子あたりの吸光係数は,
\(\Large \varepsilon = 0.434 \times 10^{-20} \ \left[ \frac{m^2}{molecule} \right] \)
となります.
\(\Large 1 \ [mol] = 6.02 \times 10^{23} [ molecule ] \)
なので,
\(\Large \frac{ [mol]}{[molecule]} = 6.02 \times 10^{23} \)
\(\Large
\begin{eqnarray}
\varepsilon
&=& 0.434 \times 10^{-20} \ \left[ \frac{m^2}{molecule} \right] \\
&=& 0.434 \times 10^{-20} \ \left[ \frac{m^2}{mol} \right] \left[ \frac{mol}{molecule} \right] \\
&=& 0.434 \times 10^{-20} \ \left[ \frac{m^2}{mol} \right] \times 6.02 \times 10^{23} \\
&=& 2.6 \times 10^3 \left[ \frac{ m^2}{mol} \right] \\
\end{eqnarray} \)
となります.したがって,
\(\Large
\begin{eqnarray}
\varepsilon
&=& 2.6 \times 10^3 \times 10 \left[ \frac{1}{M} \frac{1}{cm} \right] \\
&=& 2.6 \times 10^4 \left[ \frac{1}{M} \frac{1}{cm} \right] \\
\end{eqnarray} \)
となります.約2万,という値になります.
実際に,GFP関連のモル分子吸光係数を見てみると,数万のオーダーになっていることがわかります.
次ページに,実際の計測におけるバックグラウンドについて説明します.